（1）患者在病房清洁、消毒手术部位后，换上经消毒的衣服、裤子并戴帽子至手术室。
（2）使用手术室对接车接送。无对接车者，在手术室入口处将患者换到手术室经清洁处理过的平车上。车轮通过粘附垫吸尘处理后推入手术间。
（3）皮肤消毒:为使手术部位的皮肤达到较宽的杀菌范围，应采用两种或两种以上的混合消毒液消毒。
（4）铺无菌草:无菌单应采用不利于细菌生存的非织物材料。铺无菌单时应根据手术室空气流动方向采用不同方式:垂直层流手术间铺置的无菌单应垂直地板，如不垂于地板，就会引起空气紊流，使污染物质从地板掀起;水平层流间手术铺置地无菌单，垂在手术台前后端的部分不应超过手术台至地面距离的1/3。如果垂至地板，就会引起空气紊流，使污染物质从地板飞扬起来。而在手术台两侧的无菌单是可以垂至地板的。
（5）限制在手术台上翻动。如确实有必要翻动盖单时，应尽可能轻柔，以免带菌飘浮物沉降于无菌手术区内。
6.1 运行系统的管理
制定出系统的管理规程并严格执行，整体调控系统、运行系统和监测系统必须设专人管理。
6.2 维护性管理
整个洁净设备系统需设专门维修人员进行精心维护和修理，制定出有效可行的措施。（1）通风罩应每周清洁处理1次。（2）通风机的状况应每周检测。（3）过滤设备定期检查、维修和保养，以保证过滤设备的正常运转与良好性能。初、中效过滤器每隔30天检测一次，并用洗涤剂清洗，备用一套，以备清洗时使用。根据使用情况，初、中效过滤器应该每隔3～6个月更换一次，在更换前过滤器应是干的。在未装初、中效过滤器前设备不能运行，这样才能延长价格较贵的过滤器的使用寿命。同时，洁净室周围环境的清洁、空调送风过滤系统的正常运行和严格的使用管理规范，也是延长空气过滤器使用寿命的关键。（4）风淋室运行2年后，应检查进出门的密封性。
6.3 机房的管理
专人管理，控制净化空调设备的运行和停止。清扫并保持机房卫生。对净化手术室运行情况进行记录。
1、层流净化手术室送风气流的流型
层流净化手术室送风气流的流型在国内外主要有垂直单向流、水平单向流和非单向流等。
在我国2002年“医院洁净手术部建筑技术规范”中规定：Ⅰ级洁净手术室的100级洁净区域（手术区）的气流必须是单向流（垂直单向流），而且过滤器的满布率应75%-85%；对于Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级洁净手术室的手术区是低于100级的洁净区，其气流流型为非单向流，但送风口宜设在手术区的上方，过滤器宜集中布臵在手术区上方的送风口处，要求洁净的气流覆盖手术区，使手术区获得的净化效果。
实验证明：在各种不同的送风速度情况下，垂直单向流比水平单向流手术室的细菌浓度低。
2、层流净化手术室的风量、温度和湿度
根据2002年我国“医院洁净手术部建筑技术规范”规定：Ⅰ级洁净手术室的单向流断面风速为0.2-0.3m/s；Ⅱ级洁净手术室的换气次数为30-36次/h；Ⅲ级洁净手术室的换气次数为18-22次/h；Ⅳ级洁净手术室的换气次数为12-15次/h。
我国规定手术室内温度（℃）在22-25之间，手术室内相对湿度（%）在40-60之间
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