山东康德莱净化工程有限公司

环翠区pcr实验室净化-山东康德莱净化更优越

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样本间交叉污染


主要是在采(取)样的过程中,由于取样工具之间的交叉造成污染;或者在核酸提取的过程中,由于移液器、离心管等使用不当导致的污染。


PCR试剂的污染


要是在PCR试剂配制过程中,由于移液器、容器、阴性对照及其它试剂被核酸模板或阳性对照污染。


质粒的污染


在实验室操作中经常会用到阳性参考品,这些阳性参考品大多数是由某些质粒制作而成,质粒在单位容积内浓度高,不小心使用极易造成污染。



PCR扩增产物污染


这是PCR反应中常见的污染问题。因为PCR产物拷贝量大,远远高于PCR检测数个拷贝的极限,所以极微量的PCR产物污染,就可造成假阳性结果。还有一种容易忽视,可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染,在空气与液体面摩擦时就可形成气溶胶,据计算一个气溶胶颗粒可含4.8万拷贝,因而由其造成的污染是一个值得特别重视的问题。










PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为了避免各个实验区域间的可能性,通风方式应为机械通风,不应自然通风,且不宜使用循环风。同时要严格控制送、排风比例以保证各试验区的压力要求。PCR实验室的空气流向应按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区进行,防止扩增的产物顺空气气流进入扩增前的区域。可选择负压排风装置,区域相对于相邻区域压不小于-10Pa。也可通过安装排气扇或者其他方式实现。PCR实验室要求温度18~26℃,相对湿度30%~70%。




试剂配制室及样品处理室宜呈微正压,以防外界含核酸气溶胶的空气进入,造成污染;


可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果。


核酸扩增室及产物分析室应呈微负压,以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品,可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。


在理想情况下,PCR实验室缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内。


PCR实验室进风由原有中央空调控制,要求将中央空调风口安装到,且高度为地面铺装好后2600mm处。




如果使用荧光PCR仪,扩增室和产物分析室可以合并。


若房间进深允许,可设PCR内部走廊。需要指出的是在减少室内外空气交换方面,缓冲间比走廊更有意义。


各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验之间的相互干扰,防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。


实验室的墙体,包括顶棚,应结构牢固、气密性好;所有阴角宜采用圆弧形线条过渡;墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒;地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。