对于PCR实验室的员工而言，在进入、使用与离开实验室时都要遵守相关的操作规范。既然如此，要遵守哪些操作规范呢?下面，就为大家介绍PCR实验室的员工操作规范。

PCR实验室的员工操作规范员工在进入、使用与离开PCR实验室时要遵守以下5条操作规范：

规范1：员工进入PCR实验室前要先进入缓冲间，在工作服外加穿罩衣，戴好口罩、帽子和两层手套，穿好鞋。进入缓冲区后要随手关上外门，需要时打开照明按钮。

规范2：员工在缓冲间内首先要打开缓冲间内的空调，再打开生物安全柜的按钮，把实验所需物品放入生物安全柜中，并且等待10分钟后方能进入实验室。

规范3：员工进入PCR实验室后要先去工作区，打开照明按钮与前玻璃门，把实验所需物品放入实验台内，并且做好清洁物品与污染物品的区分。观察负压表指示数值，若数值不在预定范围内要进行负压调节。观察温湿度计，并填写温湿度计使用记录。

规范4：员工进行实验项目前必须把手臂放入生物安全柜内，待1分钟后才能开始操作。实验结束后要对实验物品进行分类处理，并对工作台面进行消毒。

规范5：工作人员在对实验物品进行分类处理的同时还要打开排风，待风10分钟后放下前玻璃门，打开生物安全柜紫外线灯进行消毒。离开实验室前脱去第二层手套，填写仪器使用记录后才能离开。

这些常见物品的外表面容易被核酸和细菌污染，主要查看这两个指标。

（1）表面核酸污染：用沾湿的拭子擦拭上述物品的外表面，然后浸泡到纯水中10min，吸取纯水作为模板进行扩增，qPCR无扩增为合格。

（2）移液器内腔核酸污染：对于常用的移液器的内部，可使用无滤芯的吸头在阴性纯水中吹吸10次后，吸取纯水作为模板进行扩增，qPCR无扩增为合格。

（3）表明细菌污染：用沾湿的无菌拭子擦拭上述物品的外表面，划琼脂平板，每个平板的菌落数不应超过一定数量（我也不确定多少合适，由于不要求无菌操作一定会有细菌，但是也不应该太多）。

非瘟和新冠后一下子新增了很多核酸检测实验室，早期大家关注的点都在设施和硬件上，但是一个检测实验室开展大量检测工作之后，检测中弱的环节决定检测的质量。我们也需要将精力放在检测中的每个细节上。

需要注意以下问题：

实验室使用的基因扩增仪，荧光定量PCR仪都是高精度仪器。一旦仪器出现一些温度或者检测上的小偏差，则很可能对实验结果产生较大的影响。因此，学会日常保养和维护是尤为重要的。

1、仪器安置

仪器应安放在湿度较低、灰尘较少并远离水源和热源的地方，无腐蚀性气体或强磁场干扰。

环境温度建议在18~35℃之间。仪器之间应保持50cm 以上距离，降低仪器之间的影响。

2、样品台、热盖定期清洁

用95%乙醇配合棉签、无尘布等工具，清洁样品台。之后运行PCR仪，设定保持温度为50℃，约5~10min，让残余液体挥发去除。另外，热盖也应该用酒精或纯水定期清洗，确保热盖清洁，温控性能良好。对于荧光定量PCR，清洁样品台和热盖的同时，去除灰尘等杂物，保证光路清洁，降低信号干扰。

3. 使用前预热

老款的PCR仪的性能比不上新款仪器，使用前需要进行预热，不仅对仪器维护有好处，还能节约实验时间。新款的仪器升温快，但还是建议能在进行实验前预热2min，这样可以有效延长仪器的使用寿命。

4. 定期运行维护

1.PCR仪器需要定期检测，视制冷方式而定一般半年至少一次。

2.PCR反应的要求温度与实际分布的反应温度是不一致的，当检测发现各孔平均温度差偏离设置温度大于1～2℃时，可以运用温度修正法纠正PCR实际反应温度差。

3.PCR反应过程的关键是升、降温过程的时间控制，要求越短越好，当PCR仪的降温过程超过60s，就应该检查仪器的制冷系统，对风冷制冷的PCR仪要较地清理反应底座的灰尘；对其他制冷系统应检查相关的制冷部件。

4.一般情况如能采用温度修正法纠正仪器的温度时，不要轻易打开或调整仪器的电子控制部件，必要时要请人员修理或利用仪器电子线路详细图纸进行维修。