对于PCR实验室的员工而言，在进入、使用与离开实验室时都要遵守相关的操作规范。既然如此，要遵守哪些操作规范呢?下面，就为大家介绍PCR实验室的员工操作规范。

PCR实验室的员工操作规范员工在进入、使用与离开PCR实验室时要遵守以下5条操作规范：

规范1：员工进入PCR实验室前要先进入缓冲间，在工作服外加穿罩衣，戴好口罩、帽子和两层手套，穿好鞋。进入缓冲区后要随手关上外门，需要时打开照明按钮。

规范2：员工在缓冲间内首先要打开缓冲间内的空调，再打开生物安全柜的按钮，把实验所需物品放入生物安全柜中，并且等待10分钟后方能进入实验室。

规范3：员工进入PCR实验室后要先去工作区，打开照明按钮与前玻璃门，把实验所需物品放入实验台内，并且做好清洁物品与污染物品的区分。观察负压表指示数值，若数值不在预定范围内要进行负压调节。观察温湿度计，并填写温湿度计使用记录。

规范4：员工进行实验项目前必须把手臂放入生物安全柜内，待1分钟后才能开始操作。实验结束后要对实验物品进行分类处理，并对工作台面进行消毒。

规范5：工作人员在对实验物品进行分类处理的同时还要打开排风，待风10分钟后放下前玻璃门，打开生物安全柜紫外线灯进行消毒。离开实验室前脱去第二层手套，填写仪器使用记录后才能离开。

PCR技术的问世使病原体检测能够快速、方便地进行。由于PCR技术假阳性率太高，只要有微量病原体存在就可得到阳性结果，这并不能作为诊断依据，只有当一定数量的病原体存在时才有临床意义。因此，对模板准确定量显得特别重要，应用荧光技术PCR就能够快速、准确地得到结果。对于解决学检测的“窗口期”问题，判断疾病是否处于隐性或亚临床状态，以及检测不能判定是现症还是既往时，均可利用PCR进行确定。

示例：新型冠状病毒核酸检测。

方法学：荧光PCR法。

用途：用于体外定性检测新型冠状病毒的疑似病例、疑似聚集例患者、其他需要进行新型冠状病毒诊断或鉴别。

检测基因：新型冠状病毒（2019-nCoV）ORFlab和N基因、E基因。

标本类型：上呼吸道标本：咽拭子、鼻拭子；下呼吸道标本：呼吸道抽取物、肺泡灌洗液样本、肺组织活检标本。

检测流程：

（1）核酸检测前的生物安全防护（工作人员个人三级防护的穿戴）→（2）样本的灭活（56℃灭活30分钟）→（3）样本的核酸提取（手工、核酸提取仪）→（4）PCR体系的配制和模板加样→（5）上机检测及结果分析→（6）检测后的消毒。

其他病原体检测：HIV、甲乙丙肝、HPV、肺支、肺衣、EB病毒、腺病毒、胞病毒、甲乙流、埃博拉病毒、B族链球菌。

适合开展的医院和：儿童医院、妇幼、儿检所、第三方、各种级别的有需求的医院。

需要注意以下问题：

实验室使用的基因扩增仪，荧光定量PCR仪都是高精度仪器。一旦仪器出现一些温度或者检测上的小偏差，则很可能对实验结果产生较大的影响。因此，学会日常保养和维护是尤为重要的。

1、仪器安置

仪器应安放在湿度较低、灰尘较少并远离水源和热源的地方，无腐蚀性气体或强磁场干扰。

环境温度建议在18~35℃之间。仪器之间应保持50cm 以上距离，降低仪器之间的影响。

2、样品台、热盖定期清洁

用95%乙醇配合棉签、无尘布等工具，清洁样品台。之后运行PCR仪，设定保持温度为50℃，约5~10min，让残余液体挥发去除。另外，热盖也应该用酒精或纯水定期清洗，确保热盖清洁，温控性能良好。对于荧光定量PCR，清洁样品台和热盖的同时，去除灰尘等杂物，保证光路清洁，降低信号干扰。

3. 使用前预热

老款的PCR仪的性能比不上新款仪器，使用前需要进行预热，不仅对仪器维护有好处，还能节约实验时间。新款的仪器升温快，但还是建议能在进行实验前预热2min，这样可以有效延长仪器的使用寿命。

4. 定期运行维护

1.PCR仪器需要定期检测，视制冷方式而定一般半年至少一次。

2.PCR反应的要求温度与实际分布的反应温度是不一致的，当检测发现各孔平均温度差偏离设置温度大于1～2℃时，可以运用温度修正法纠正PCR实际反应温度差。

3.PCR反应过程的关键是升、降温过程的时间控制，要求越短越好，当PCR仪的降温过程超过60s，就应该检查仪器的制冷系统，对风冷制冷的PCR仪要较地清理反应底座的灰尘；对其他制冷系统应检查相关的制冷部件。

4.一般情况如能采用温度修正法纠正仪器的温度时，不要轻易打开或调整仪器的电子控制部件，必要时要请人员修理或利用仪器电子线路详细图纸进行维修。