PCR实验室设计的问题是如何避免污染。在实际工作中,常见的有以下几种污染类型:扩增产物的污染;天然基因组DNA的污染;试剂的污染以及标本间的污染。因此要避免污染,首先应是预防,而不是排除。
工作区域的严格划分,各个实验区域要有明显的标记(如醒目的门牌或不同的地面颜色等),以避免各个不同实验区域设备物品、试剂等发生混淆。
合理的系统设置,合理的空调通风系统设置,尽量采用全送全排的空调系统;严格的气流压力控制,保证不同的实验区内不同的压力要求。
规范的操作,临床基因扩增检验实验室的技术人员必须进行上岗培训,在实验操作过程中,操作者必须戴手套,并经常更换。清洁工作及时、正确。实验工作结束后,必须立即对本区进行清洁。
严格的管理:严格控制进出实验室的人员。在各个实验区域使用带有明显区别标志的工作服(如不同颜色),当工作人员离开时不得将本区的工作服带至其它区域;尽量减少在实验区内不必要的走动以减少交叉污染的可能性。扩增产物分析区是的扩增产物污染来源,废液不能在实验室中倾倒,必须经消毒液浸泡消毒后在远离实验室的地方弃掉,用过的吸头等一次性材料也应经消毒液浸泡消毒后统一处理,如焚烧等。总之,实验室建设是一个复杂的问题,这里不讨论人员的问题,实验室人员的培养与沉淀,也需要一个过程,在建设的过程中要因地制宜,不要生搬硬套,结合自己的实际慢慢摸索出适合自己发展的建设思路。科学合理建设实验室,更好的发挥实验室的作用。
尽管扩增序列的残留污染大部分是假阳性反应的原因,样品间的交叉污染也是原因之一。因此,不仅要在进行扩增反应是谨慎认真,在样品的收集、抽提和扩增的所有环节都应该注意:
1.戴一次性手套,若不小心溅上反应液,立即更换手套;
2.使用一次性吸头,严禁与PCR产物分析室的吸头混用,吸头不要长时间暴露于空气中,避免气溶胶的污染;
3.避免反应液飞溅,打开反应管时为避免此种情况,开盖前稍离心收集液体于管底。若不小心溅到手套或桌面上,应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面;
4.操作多份样品时,制备反应混合液,先将dNTP、缓冲液、引物和酶混合好,然后分装,这样即可以减少操作,避免污染,又可以增加反应的度;
5.加入反应模板,加入后盖紧反应管;
6.操作时设立阴阳性对照和空白对照,即可验证PCR反应的可靠性,又可以协助判断扩增系统的可信性;
7.尽可能用可替换或可高压处理的加样器,由于加样器受产物气溶胶或标本DNA的污染,使用可替换或高压处理的加样器。
如没有这种特殊的加样器,至少PCR操作过程中加样器应该,不能交叉使用,尤其是PCR产物分析所用加样器不能拿到其它两个区;
8.重复实验,验证结果,慎下结论。
净化车间改造随着环境科学、食品科学、净化工程技术设计要求进行改造,通常无尘车间改造都是高度为3m的旧厂房,面积、形状与实际需求差异大,所以不能按照常规安装风管。
人们对健康开始逐渐重视起来,与此同时随着科学的进步,大量的新观念与新技术被应用于接受,这为改善净化车间的洁净环境创造了良好的条件,特别是对于医院手术室食品光电的设计提出了新的要求高校洁净净化车间的空气处理方式也已经被提上日程。
在净化车间的设计中,净化建设设计是重要的构成部分,相关工作人员提醒大家:在净化车间时,一定要格外注意……
满足生活参工艺对建筑设计的要求,实现制造空间与设施。
实现可以经济运行的设施,从而达到节约能源、易于维护,降低造价。
实现可以适应未来变化的设施。
使用可靠性高的运行设备。