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对于PCR实验室的员工而言,在进入、使用与离开实验室时都要遵守相关的操作规范。既然如此,要遵守哪些操作规范呢?下面,就为大家介绍PCR实验室的员工操作规范。


PCR实验室的员工操作规范员工在进入、使用与离开PCR实验室时要遵守以下5条操作规范:


规范1:员工进入PCR实验室前要先进入缓冲间,在工作服外加穿罩衣,戴好口罩、帽子和两层手套,穿好鞋。进入缓冲区后要随手关上外门,需要时打开照明按钮。


规范2:员工在缓冲间内首先要打开缓冲间内的空调,再打开生物安全柜的按钮,把实验所需物品放入生物安全柜中,并且等待10分钟后方能进入实验室。


规范3:员工进入PCR实验室后要先去工作区,打开照明按钮与前玻璃门,把实验所需物品放入实验台内,并且做好清洁物品与污染物品的区分。观察负压表指示数值,若数值不在预定范围内要进行负压调节。观察温湿度计,并填写温湿度计使用记录。




规范4:员工进行实验项目前必须把手臂放入生物安全柜内,待1分钟后才能开始操作。实验结束后要对实验物品进行分类处理,并对工作台面进行消毒。


规范5:工作人员在对实验物品进行分类处理的同时还要打开排风,待风10分钟后放下前玻璃门,打开生物安全柜紫外线灯进行消毒。离开实验室前脱去第二层手套,填写仪器使用记录后才能离开。









需要注意以下问题:


实验室使用的基因扩增仪,荧光定量PCR仪都是高精度仪器。一旦仪器出现一些温度或者检测上的小偏差,则很可能对实验结果产生较大的影响。因此,学会日常保养和维护是尤为重要的。


1、仪器安置


仪器应安放在湿度较低、灰尘较少并远离水源和热源的地方,无腐蚀性气体或强磁场干扰。


环境温度建议在18~35℃之间。仪器之间应保持50cm 以上距离,降低仪器之间的影响。


2、样品台、热盖定期清洁


用95%乙醇配合棉签、无尘布等工具,清洁样品台。之后运行PCR仪,设定保持温度为50℃,约5~10min,让残余液体挥发去除。另外,热盖也应该用酒精或纯水定期清洗,确保热盖清洁,温控性能良好。对于荧光定量PCR,清洁样品台和热盖的同时,去除灰尘等杂物,保证光路清洁,降低信号干扰。


3. 使用前预热


老款的PCR仪的性能比不上新款仪器,使用前需要进行预热,不仅对仪器维护有好处,还能节约实验时间。新款的仪器升温快,但还是建议能在进行实验前预热2min,这样可以有效延长仪器的使用寿命。


4. 定期运行维护


1.PCR仪器需要定期检测,视制冷方式而定一般半年至少一次。


2.PCR反应的要求温度与实际分布的反应温度是不一致的,当检测发现各孔平均温度差偏离设置温度大于1~2℃时,可以运用温度修正法纠正PCR实际反应温度差。




3.PCR反应过程的关键是升、降温过程的时间控制,要求越短越好,当PCR仪的降温过程超过60s,就应该检查仪器的制冷系统,对风冷制冷的PCR仪要较地清理反应底座的灰尘;对其他制冷系统应检查相关的制冷部件。


4.一般情况如能采用温度修正法纠正仪器的温度时,不要轻易打开或调整仪器的电子控制部件,必要时要请人员修理或利用仪器电子线路详细图纸进行维修。

     1、温湿度


     冬季18-24℃,夏季25-28℃,湿度40-70%。


     2、空气过滤及气流组织要求


     新风经热湿处理及三级(初效+中效+/亚)过滤后送入室内;各房间排风口单独设置或亚过滤器。


     当房间无工艺设备排风时,可通过换气次数(工艺操作间换气次数为12~15次/h,缓冲间6~8次/h)计算得出房间送风量,然后根据缝隙法得出房间排风量;当房间有工艺设备(如生物安全柜)排风时,比较设备排风量与满足换气次数所需送风量,取两者之间的较大值(一般情况下,设备排风量较大),然后可根据缝隙法得出房间送风量。根据以上计算风量为设计依据,由此可对新风机组、排风机组及附属的风管风口进行选型和计算。


     气流组织上,PCR实验室空调系统通常采用上送下排式的非单向流送风方式。房间上部送风口尽量均匀布置,且与生物安全柜操作面或其他有气溶胶操作地点的正上方保持一定距离;房间下部利用室内排风夹道上设置的排风口排风,排风口底部距地面0.1m,排风夹道需设置于室内被污染风险的区域,排风口前面不应有障碍物遮挡。




     3、压力控制


     在空调系统各房间送风支管上设置压力无关型定风量阀,无工艺设备排风房间的排风支管上设置压力无关型定风量阀,从而恒定房间的风量以控制房间压力;在有工艺设备排风房间的排风支管上设变风量阀,根据房间内压差动作,以控制房间压力。需排风的工艺设备(如生物安全柜)排风支管上设变风量阀,根据设备开启度调节设备排风量。