实验结束后应该对操作台面,仪器,实验用具及环境进行清洁,这对污染的控制尤为重要。
1、实验后所有的试剂按照要求进行存放,废料和废液及时清理,避免存放过多和过久,废液缸用有效氯含量为2000mg/L消毒水浸泡消除核酸污染;
2、离心管架、试管架等可重复使用的物品浸泡到500mg/L 的消毒液中过夜,第二天用清水清洗后晾干使用;
3、对各区的生物安全柜、洁净工作台先用75%酒精或者500mg/L 的消毒液擦拭后采用紫外灯进行消毒处理;
4、配制含有效氯500mg/L的消毒液对设备表面、台面、地面、物品表面、传递窗内及门窗进行擦拭,再用纯化水对设备表面、台面、进行擦拭,避免消毒液对实验器具的腐蚀,仪器如核酸提取仪采用内部紫外消毒程序进行照射;
5、操作台面使用移动紫外消毒车近距离辐照1小时,应使灯管距离工作区的距离在60-90cm;实验室内则使用室内紫外灯整晚辐照。
尽管扩增序列的残留污染大部分是假阳性反应的原因,样品间的交叉污染也是原因之一。因此,不仅要在进行扩增反应是谨慎认真,在样品的收集、抽提和扩增的所有环节都应该注意:
1.戴一次性手套,若不小心溅上反应液,立即更换手套;
2.使用一次性吸头,严禁与PCR产物分析室的吸头混用,吸头不要长时间暴露于空气中,避免气溶胶的污染;
3.避免反应液飞溅,打开反应管时为避免此种情况,开盖前稍离心收集液体于管底。若不小心溅到手套或桌面上,应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面;
4.操作多份样品时,制备反应混合液,先将dNTP、缓冲液、引物和酶混合好,然后分装,这样即可以减少操作,避免污染,又可以增加反应的度;
5.加入反应模板,加入后盖紧反应管;
6.操作时设立阴阳性对照和空白对照,即可验证PCR反应的可靠性,又可以协助判断扩增系统的可信性;
7.尽可能用可替换或可高压处理的加样器,由于加样器受产物气溶胶或标本DNA的污染,使用可替换或高压处理的加样器。
如没有这种特殊的加样器,至少PCR操作过程中加样器应该,不能交叉使用,尤其是PCR产物分析所用加样器不能拿到其它两个区;
8.重复实验,验证结果,慎下结论。
无尘车间相对来说是一个特殊的空间,对于各行各业生产加工或者,对于室内空间都有特别严格的要求;没有得到相关的允许和准备,根本进不去。那要进入无尘车间的人员需要具备什么资格呢?
一、严禁未经核准人员进入无尘车间;
二、进入无尘车间人员需遵守洁净室之安全规定;
三、尚未被认可的员工、外宾及承揽商须进入无尘车间者,应先报备申请批准,并应有合格人员陪同在场始得进入;
四、经训练合格及主管审核后之人员得进入无尘车间;
五、凡违反上述规定给公司造成的经济上损失者将根据损失情况,给予相应处罚。如因原因特殊需进入无尘车间的人员,需要进行以上资格申请。