PCR不同区域可合并情况(一)
场景:使用实时荧光PCR仪
依据:关于印发《机构临床基因扩增管理办法》的通知;机构临床基因扩增检验实验室工作导则;卫办医政发〔2010〕194号
合并:扩增区、扩增产物分析区可合并
PCR不同区域可合并情况(二)
场景:采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪
依据:关于印发《机构临床基因扩增管理办法》的通知;机构临床基因扩增检验实验室工作导则;卫办医政发〔2010〕194号
合并:标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。
辅料的质检应结合实际工作中可能用到的场景,并非越苛刻越好,需要每个实验室结合自身情况来设计和调整文中提到的参数。
1.离心管
(1)渗漏密闭性:将n个离心管加入半量墨汁,盖好盖子后放入水中,浸泡30min,没有墨汁渗出为合格。
(2)离心密闭性:将n个离心管加入半量纯水,放入离心机,10000 rpm,30min,管盖未崩开未漏液为合格。
(3)热密闭性:将n个离心管加入半量纯水,盖好盖子称重后放入金属浴中,65℃或90℃(巴氏消毒),30min,再进行称重,离心管未变形,管盖未崩开未漏液,前后重量未变化为合格。
(4)冷密闭性:将n个离心管加入半量纯水,放入-20℃冰箱,24h,离心管未变形,管盖未崩开未漏液为合格。
(5)污染物质检:将n个离心管分别加入半量阴性纯水,盖好盖子涡旋1 min后静置5min,吸取纯水作为模板进行扩增,qPCR无扩增为合格。
(6)抑制物质检:将n个离心管分别加入弱阳性质控物,室温静置5min,然后进行提取;RNA核酸,DNA核酸,室温静置5min,作为模板进行扩增,qPCR扩增未被抑制为合格。
故障现象一:分机听见主机声音,但主机听不见分机声音。
分析与维修:首先划分为两种情况:
(1)所有分机均可听见主机声音,但主机连一台分机的声音都听不到;
(2)所有分机都可听见主机声音,但主机只有某台分机声音听不见。
通过试验,判断故障到底属于上面两种情况中的哪一种,如果为种情况,就是主机话筒或话筒线故障,把话筒线两端的插头从卡座中拨出,再重新插回,仍然没有声音,然后打开话筒外壳,观察里面的连线时发现内部磁电式的一条连接导线从焊接处脱出,焊回该条导线后即可听见声音;
如果为第二种情况,则有三种可能引起故障的原因:
(1)话筒内部连线断裂或损坏;
(2)分机麦克风(MIC)坏;
(3)分机音频放大三极管Q4(型号:9014)或Q5型号:9013)损坏。
先打开话筒外壳,检查发现导线连接牢固,用万用表测量亦正常,把故障分机与临近病房的电源插座和按钮(内置MIC插座相连,故障依旧,说明与分机MIC无关,焊出电路板上音频放大管Q4、Q5检查,发现Q4c、e 极间击穿,更换Q4,恢复正常。
故障现象二:主机听见分机声音,分机听不见主机声音。
分析与维修:该故障也可分为两种情况:
(1)所有分机听不见主机声音;
(2)单台分机听不见主机声音。
种情况故障点在主机上,着重检查主机电话机及连线,拆开话筒,可见话筒内的麦克风焊接处断开,用烙铁将断线焊牢;
第二种情况故障出在分机上,着重检查电路板上的扬声器控制继电器Jl,在Jl线圈两端加12VDC电压,测量JK触点,发现触点接触不良,更换新的继电器,故障消失。
故障现象三:按下分机呼叫按钮,红灯不亮。
分析与维修:分机盒上的红色指示灯代表正在呼叫。按复位钮,红灯亮,表明指示灯本身无问题,用万用表测量呼叫按钮薄膜开关,发现开关断开,肉眼可见开关有碳化痕迹,可以肯定开关己坏,更换新的薄膜开关,机械恢复正常。